Cyanine3 tetrazine 是一種結(jié)合了 Cyanine3（Cy3）熒光染料 和 四嗪（Tetrazine） 基團(tuán)的功能性化合物，廣泛應(yīng)用于生物分子標(biāo)記、熒光成像和生物正交化學(xué)等領(lǐng)域。以下是關(guān)于該化合物的詳細(xì)介紹：

一、化學(xué)結(jié)構(gòu)與組成

1. Cyanine3（Cy3）熒光染料：

• 屬于菁類染料，具有明亮的橙紅色熒光。

• 激發(fā)波長(zhǎng)約 550 nm，發(fā)射波長(zhǎng)約 570 nm。

• 熒光亮度高、光穩(wěn)定性好，且對(duì)生物分子的毒性較低，適合用于生物樣品的熒光標(biāo)記與成像。

2. 四嗪（Tetrazine）基團(tuán)：

• 是逆電子需求 Diels-Alder 反應(yīng)（IEDDA）的關(guān)鍵反應(yīng)伙伴。

• 可與反式環(huán)辛烯（TCO）發(fā)生極快速的反應(yīng)，該反應(yīng)無(wú)需催化劑，在生理?xiàng)l件下即可進(jìn)行，且特異性較高。

結(jié)構(gòu)式：

二、物理化學(xué)性質(zhì)

• 外觀：深紅色固體。

• 分子量：662.28

• 分子式：C39H44ClN7O

• 溶解性：

• 可以在非水環(huán)境以及含有一些有機(jī)助溶劑（如乙腈或 DMSO）的水性介質(zhì)中進(jìn)行標(biāo)記。

• 對(duì)于純水介質(zhì)中的反應(yīng)，可以使用該試劑的磺化版本，以提高水溶性。

• 穩(wěn)定性：

• 在避光、低溫條件下儲(chǔ)存穩(wěn)定，避免強(qiáng)光和高溫造成性能下降。

• 建議分裝保存，避免反復(fù)凍融。

三、核心特性與應(yīng)用

1. 高效熒光標(biāo)記：

• Cyanine3 tetrazine 兼具 Cy3 的熒光成像能力和四嗪的高效點(diǎn)擊反應(yīng)活性，可實(shí)現(xiàn)對(duì)生物分子的高度選擇性標(biāo)記。

• 適用于蛋白質(zhì)、多肽、核酸等生物分子的標(biāo)記，通過(guò)熒光成像技術(shù)觀察其在細(xì)胞或生物體內(nèi)的分布和動(dòng)態(tài)變化。

2. 生物正交反應(yīng)：

• 四嗪基團(tuán)可與 TCO 修飾的生物分子發(fā)生快速、特異性的 IEDDA 反應(yīng)，無(wú)需催化劑，反應(yīng)條件溫和。

• 適用于活細(xì)胞或活體中的原位標(biāo)記，對(duì)細(xì)胞損傷小，背景干擾低。

3. 活細(xì)胞與活體成像：

• 在活細(xì)胞成像中，可實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)生物分子的動(dòng)態(tài)分布和相互作用。

• 在活體成像中，可實(shí)時(shí)追蹤藥物載體或探針的體內(nèi)分布和靶向結(jié)合過(guò)程。

4. 多重?zé)晒獬上?/span>：

• Cy3 的熒光波長(zhǎng)位于可見光區(qū)，可與其他波長(zhǎng)的熒光染料（如 Cy5、FITC）搭配使用，實(shí)現(xiàn)對(duì)多種生物分子的同時(shí)特異性標(biāo)記與成像。

5. 免疫分析與定量檢測(cè)：

• 可用于標(biāo)記 TCO 修飾的抗體或抗原，通過(guò)熒光信號(hào)檢測(cè)實(shí)現(xiàn)對(duì)目標(biāo)分析物的高靈敏度定量分析。

四、特點(diǎn)

• 熒光性能優(yōu)異：Cy3 的橙紅色熒光適配活細(xì)胞成像，光毒性低，高量子產(chǎn)率與光穩(wěn)定性支持長(zhǎng)時(shí)間、高信噪比成像。

• 反應(yīng)高效特異：四嗪-TCO 反應(yīng)速率極快，無(wú)需銅催化劑或高溫，生物相容性優(yōu)異，適合活體應(yīng)用。

• 水溶性與穩(wěn)定性好：雙磺酸基團(tuán)提升水相穩(wěn)定性，適用于水性生物系統(tǒng)，化合物保存期長(zhǎng)，實(shí)驗(yàn)重復(fù)性好。

• 模塊化與通用性強(qiáng)：可與多種靶向分子（抗體、多肽、核酸）或功能模塊（藥物、成像探針）配對(duì)，實(shí)現(xiàn)“先靶向，后標(biāo)記"的靈活策略。

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